△浙江海隆生物科技股份有限公司张强博士
CHO细胞系表达系统以增加产量,降低成本为目的进行开发。通过对载体进行改造,如载体表达框架的优化,包括启动子,内含子,顺势调控原件,miRNA,筛选标记基因等,克隆位点效应,定点整合等。选择不同转染方式,如电转、化转以及病毒转染都各有优势。CHO细胞系本身进行改造,如基因突变,已构建了基因突变细胞系CHO-DXB11,CHO-DHFR-/-),定点缺失,靶向敲除DHFR、GS基因,促凋亡蛋白BAK、BAX,以提高外源基因的扩增。此外优化培养基和培养条件,商业化培养基、个性化培养基以及保护剂和氨基酸等补料等,pH值、温度、转速等均影响着细胞生长状态,进而影响蛋白的表达质量。
张强博士表示,全球目前已上市的基于哺乳动物细胞生产的生物制品超过100多种,其中80%是基于CHO细胞表达系统,如呼吸道合胞体病毒亚单位疫苗的开发,重组猪瘟E2蛋白亚单位疫苗和流行性腹泻亚单位疫苗的研发等。CHO细胞表达系统因其固有优势,和未来对于表达系统更适合的优化,会表达出更优质的重组蛋白,为科研以及医疗提供更稳定的支撑。